免疫组织化学在科研及临床中的应用

免疫组织化学（简称免疫组化）是利用免疫反应来定位组织或细胞中某些抗原成分的存在和分布的一门技术。将荧光素或酶标记抗体与组织切片中的相应抗原结合，在荧光抗体定位处可发出荧光，用荧光显微镜可检出抗原物质所处的部位；酶标记的抗体通过底物的显色反应，用普通光学显微镜可对被测抗原物质定性或准确定位。

    当前免疫组织化学技术中用来检测组织（包括肿瘤组织内抗原的抗体已达数千种，依据制备抗体的不同技术可将抗体分成多克隆抗体和单克隆抗体两大类：
      ①多克隆抗体的效价较高、制备较方便，故价格低廉，而且大多可用于常规石蜡切片标记。但缺点是易发生非特异交叉反应,目前可采用优选蛋白氨基酸多肽片断加以解决。
      ②单克隆抗体的特异性高，质量和效价稳定.缺点是价格较贵，有些单克隆抗体只能用新鲜标本冰冻切片标记，使用受到一定限制。两类抗体各有利弊，可酌情选用。
免疫组化的应用是肿瘤病理诊断技术的一次飞跃，它将形态学观察和抗原抗体反应的特异性以及免疫标记技术的敏感性相结合，可以在组织原位显示肿瘤所含的抗原成分，用于肿瘤诊断和鉴别诊断、病因和病变机理的研究。 
    目前比较常用的免疫组化方法是PAP法（辣根过氧化物酶-抗辣根过氧化物酶法）和ABC法（卵白素-生物素法），而ABC法更为常用。ABC法是利用蛋清中提取的一种糖蛋白-亲和素（A）能与4个生物素（B）结合的能力，用2种抗体逐级放大。第一抗体（Ab1）与组织中的待测抗原结合，第二抗体是生物素标记的兔抗鼠Ig（Ab2），能与Ab1结合，然后加入酶标记的亲和素，再加底物显色，形成Ag-Ab1-Ab2-B-A-酶-底物的反应模式，可对待测抗原进行定性和定位。

    免疫组织化学技术在肿瘤病理诊断上主要用于：

      ①分化差恶性肿瘤的诊断和鉴别诊断；
      ②恶性淋巴瘤的诊断、鉴别诊断和功能分类；
      ③证实内分泌肿瘤和神经内分泌肿瘤；
      ④应用肿瘤胚胎性抗菌素原诊断某些肿瘤，如高胚抗原（CEA）对胃肠道癌、甲胎蛋白（AFP）对肝癌和卵巢内胚窦癌诊断有帮助；
      ⑤确定同一肿瘤中的多种成分；
      ⑥有时可帮助确定肿瘤的良恶性，如应用免疫球蛋白轻链κ和λ来鉴别滤泡性恶性淋巴瘤和滤泡性反应性增生；
      ⑦研究组织来源不明的肿瘤；
      ⑧研究某些癌症与病毒的关系，如肝癌与乙型肝炎病毒、鼻咽癌与EB病毒、宫颈癌与乳头状瘤病毒等的关系；
      ⑨为肿瘤治疗的选择提供依据，如乳腺癌检测雌、孕激素受体（ER、PR）呈阳性时，应用他莫昔芬（三苯氧胺）治疗可预期获得较好的疗效；
      ⑩检测癌基因和抑癌基因蛋白产物（如c-erbB2，p53）、增生活性抗原（如Ki-67，PCNA）用来估计肿瘤的预后。